Гематоген из крови

Эти несложные правила помогут Вам получать удовольствие от общения на нашем сайте!

Для того, чтобы посещение нашего сайта и впредь оставалось для Вас приятным, просим неукоснительно соблюдать правила для комментариев:

Сообщение не должно содержать более 2500 знаков (с пробелами)

Языком общения на сайте АиФ является русский язык. В обсуждении Вы можете использовать другие языки, только если уверены, что читатели смогут Вас правильно понять.

В комментариях запрещаются выражения, содержащие ненормативную лексику, унижающие человеческое достоинство, разжигающие межнациональную рознь.

Запрещаются спам, а также реклама любых товаров и услуг, иных ресурсов, СМИ или событий, не относящихся к контексту обсуждения статьи.

Не приветствуются сообщения, не относящиеся к содержанию статьи или к контексту обсуждения.

Давайте будем уважать друг друга и сайт, на который Вы и другие читатели приходят пообщаться и высказать свои мысли. Администрация сайта оставляет за собой право удалять комментарии или часть комментариев, если они не соответствуют данным требованиям.

Введение

Современная концепция безопасности предполагает, что лицам со слабыми вариантами антигена А (А2, А3 и др.), нуждающимся в частых трансфузиях эритро­цитсодержащих компонентов, следует переливать донорские эритроциты, не содержащие антиген А1. Подобный подход обусловлен тем, что при трансфу­зии эритроцитов А больным с антигеном А или дру­гими слабыми вариантами возможно образование аллоиммунных анти-А -антител, а если такие анти­тела уже присутствуют, то существует риск развития посттрансфузионных реакций и осложнений . У лиц с ослабленной экспрессией антигена А в крови могут присутствовать природные анти-А -антитела (экстраагглютинины). Анти-А-экстраагглютинины имеют 1-2 % лиц с подгруппой А2 и 25 % лиц с под­группой А2В . Иногда анти-А1 можно обнаружить в сыворотке лиц с другими слабыми подгруппами ан­тигена А. Экстраагглютинины анти-А могут вызывать расхождения в результатах АВ0 тестирования и про­бы на индивидуальную совместимость. Реципиентам с иррегулярными анти-А1-аантителами рекоменду­ется переливать эритроциты, не несущие антиген А1 . На практике это правило часто распространя­ют на всех реципиентов с подгруппой А2 , особенно нуждающихся в частых трансфузиях эритроцитсо­держащих компонентов. Экстраагглютинины анти-А имеют, как правило, низкие титр и авидность, поэто­му их не всегда можно обнаружить при исследовании сыворотки со стандартными эритроцитами в процессе перекрестного АВ0-тестирования. В связи с этим про­блема своевременного выявления больных со слабыми вариантами антигена А остается актуальной.

Антиген А характеризуется высоким полиморфиз­мом, т.е. представлен различными вариантами (под­группами), которые кодируются разными аллелями гена АВ0*А. Генетические основы системы АВ0, а так­же молекулярно-генетические события, приводящие к формированию разнообразных аллельных вариантов гена АВ0′:А, подробно освещены в обзорах . Две основные подгруппы антигена А — это А и А . Частота встречаемости подгрупп А1 и А2 различна в разных по­пуляциях. У лиц европеоидной расы среди групп А и АВ около 80-88 % принадлежат к А или А В, а остальные 12-20 % — к А2 или А2В . Частота встречаемости антигена Асреди лиц группы А составляет 14,7-17,8 %; частота фенотипа А В среди лиц группы АВ составляет 23,5-26,2 % . Выраженный дисбаланс существует и в других популяциях . Одной из причин такого дисбаланса может быть разное фенотипическое прояв­ление аллеля А(К101) в группах А и АВ: гетерозиготный генотип A(R101)/0 экспрессируется как А:-фенотип, а ге­терозиготный генотип A(R101)/В — как А2В-фенотип, что приводит к возрастанию частоты А2В по сравнению с А2 .

Важнейшим различием между А и А фенотипами яв­ляется существенная разница в количестве экспрессиру­емых на эритроците эпитопов антигена А. На эритроци­тах А их около 106, что примерно в четыре раза больше, чем на эритроцитах А2 . Подгруппы слабее А2 (A3, Ax, Am, Ael) встречаются редко и характеризуются дальней­шим уменьшением числа сайтов антигена А на эритро­цитах. Подгруппы часто обнаруживают либо по очень слабой агглютинации, либо по расхождению между ре­зультатами прямого и обратного тестирования эритро­цитов при перекрестном определении группы АВ0.

Помимо количественных, у эритроцитов А и А есть качественные различия. У лиц с группами кро­ви А или А В могут вырабатываться анти-А -антите­ла, однако никогда не бывает наоборот. Это означает, что эритроциты А отличаются от А отсутствием ка­кой-то структуры. Серологическое разделение было подтверждено генетически, когда было показано суще­ствование двух различных ферментов . Фермент А2-гликозилтрансфераза обладает более низкой актив­ностью и имеет болееузкую субстратную специфичность по сравнению с ферментом А1-гликозилтрансферазой.

Эритроциты А1 и А2 одинаково сильно реагируют с современными реагентами анти-А в методе прямой агглютинации. Различие между А — и А2-эритроцитами может быть установлено путем тестирования с анти-А1 лектином и моноклональными антителами анти-А . Эти реагенты вызывают агглютинацию эритро­цитов А1 и А1В, не реагируют с эритроцитами А2В, но могут вызывать слабую агглютинацию эритроци­тов А2. Установленного стандарта для реагентов и ме­тода не существует, поэтому нередки несоответствия в результатах, полученных с применением различных реагентов и в разных лабораториях .

Целью настоящей работы было создать стратегию определения вариантов антигена А с применением до­ступных реагентов в реакции агглютинации.

Материалы и методы

В исследовании использовали образцы крови доно­ров, полученные в отделении заготовки крови ФГБУ «НМИЦ гематологии» МЗ РФ после получения ин­формированного согласия; все тесты проводили после завершения иммуносерологического тестирования и исследования на патогены. Материалом исследова­ний были образцы крови 23 человек со слабым вари­антом антигена А, из которых у 16 человек была груп­па крови А2, у 5 — группа A2B, у 2 — серологически была определена группа A3, а также 12 образцов крови с антигеном А в качестве контроля (из них у 6 человек была группа крови А и у 6 — группа AB).

Применяли следующие методы.

Перекрестное определение группы крови систе­мы АВ0 в реакции агглютинации на плоскости с ис­пользованием Эритротест Цоликлонов анти-А (сер. 423R и 433F) и анти-В (сер 424R) (ООО «Гематолог», Москва) и стандартных эритроцитов групп А1, В, 0 (BioRad, США). Активными компонентами Цоликлонов являются моноклональные антитела класса IgM мыши: клоны А-90/16 и Birma (Цоликлон анти-А вариант R), клоны А-90/16, А-86/3 и 9113D10 (Цоликлон анти-А вариант F), клон В-85/2-В8 (Цоликлон анти-В вариант R).

Определение подгруппы антигена А в реакции аг­глютинации на плоскости с использованием монокло­нального реагента Цоликлона анти-А1 (сер. 261) (кло­ны 1Е3 и 5Е6), Эритротест анти-А: лектина (сер. 259), Цоликлона анти-Нкра (сер. 735) (клон Н-89/8) (ООО «Гематолог», Москва); анти-А1 лектина (сер. 020317В), анти-Н (А2) (сер. 080517С) (клон 10934C11) (ImuMed Antitoxin, Германия); анти-А1-лектина (сер. 118100201) (Bio-Rad, США). Силу реакции оценивали по 4-крестовой системе через 5 мин после смешивания эритро­цитов с реагентом в соответствии с таблицей 1.

Таблица 1. Оценка силы реакции гемагглютинации

Table 1. Strength of haemagglutination reaction

Сила реакции

Strength of agglutination

Вид агглютинации

Agglutination type

4+

Полная агглютинация, т.е. один плотный агглютинат

Complete agglutination, i.e. one solid agglutinate

3+

Смесь нескольких крупных и средних агглютинатов

Several large and medium agglutinates

2+

Смесь средних и мелких агглютинатов

А mixture of medium-sized and small agglutinates

1 +

Мелкие агглютинаты

Small agglutinates

+/-

Очень мелкая агглютинация на фоне свободных эритроцитов (смешанная агглютинация)

Weak granularity in the red cell suspension (mixed-field)

Отсутствие агглютинации

No agglutination

ДНК-анализ генаАВ0*А выполняли двумя методами: полимеразной цепной реакцией (ПЦР) и прямым сек- венированием. Геномную ДНК выделяли с помощью реактивов фирмы BAG (Германия) по методике произ­водителя и по стандартной методике депротеинизации фенолом после лизиса с протеиназой К. Концентрацию и чистоту ДНК определяли на спектрофотометре. Одна оптическая единица (OD) соответствовала кон­центрации ДНК 50 нг/мкл. Чистота ДНК, определяе­мая по отношению показателей при 260 и 280 нм (OD 260/280), составляла 1,6-1,8, концентрация конечной ДНК — 50-100 нг/мкл.

ПЦР проводили с помощью праймеров для выяв­ления вариантов генов системы АВ0 (AB0-variant kit) фирмы BAG (Германия). Детекцию полученных ре­зультатов осуществляли посредством электрофореза продуктов амплификации в 2%-ном агарозном геле, со­держащем бромистый этидий (1мкг/мл) в TBE-буфере. Результаты визуализировали в ультрафиолетовом све­те (λ = 310 нм) при помощи транс-иллюминатора в виде полос ярко-оранжевого цвета. Наличие полос ампли­фикации внутреннего положительного контроля сви­детельствовало о корректности проведенной ПЦР Прямое секвенирование проводили по методу Сэнгера с помощью набора реактивов ABIPRISM®BigDyeTMT erminatorv.3.1. У всех образцов секвенировали экзоны 6 и 7 гена АВ0*А.

Результаты

В работе представлены результаты исследования образцов эритроцитов со слабыми вариантами антиге­на А с помощью различных реагентов — анти-А -лектина, анти-А1-моноклональных антител и дополни­тельного реагента — анти-Н-моноклональных антител для демонстрации возможности дифференцирования подгрупп антигена А серологическими методами. Принадлежность эритроцитов к той или иной под­группе была подтверждена генетическим тестирова­нием.

Детальные результаты исследований показаны в та­блице 2. Результаты реакции с Цоликлонами анти-А и анти-В приведены для демонстрации групповой при­надлежности (столбцы 1-3). Группу АВ0 подтвержда­ли перекрестным тестированием, то есть реакцией сыворотки со стандартными эритроцитами А, В, 0 (данные не приведены). Цоликлоны анти-А с индекса­ми R и F отличались по составу и содержали продукты различных клонов. Оба реагента одинаково активно реагировали с подгруппами А1, А2 и А3 (столбцы 1-2), что соответствовало требованиям к реагентам для ру­тинного тестирования.

В таблице 2 приведено сравнение четырех различ­ных анти-А -реагентов, три из которых представляли собой раствор лектина DoLichos biflorus (столбцы 5-7) и один реагент, Цоликлон анти-А , был смесью двух моноклональных антител (столбец 4). Результаты эксперимента и лабораторная практика показа­ли, что все анти-А -реагенты не взаимодействовали с эритроцитами A2B, но часто реагировали с эри­троцитами A2. Лектины анти-А1 производства фирм BioRad и ImuMed (Antitoxin) вызывали крупную аг­глютинацию А — и АВ-эритроцитов, но также явно реагировали (на 1+ — 2+) с большинством образцов эритроцитов А2. Эта реакция была существенно сла­бее, чем с A -эритроцитами, однако могла ввести в за­блуждение, особенно при отсутствии положительных (A) и отрицательных (А) контрольных образцов (эритроцитов A нет в доступных панелях стандарт­ных эритроцитов). Моноклональный реагент анти-А1 реагировал с А2-эритроцитами более избирательно: сила реакции с эритроцитами A2 было слабой (на 1+), но он менее активно реагировал и с эритроцитами А1 и A1B — агглютинация начинала формироваться позд­нее, и сила реакции была не выше 3+.

Таблица 2. Результаты серологического и генетического определения подгруппы антигена А; сравнение эффективности и специфичности анти-Al реагентов

Table 2. The results of the serological and genetic determination of the subgroup of antigen A; comparison of the efficacy and specificity of anfi-AI reagents

Эритроциты донора/больного

Red blood cells of donor/patient (№)

Результаты анализа (сила агглютинации)

Test results (agglutination strength)

АВО-группа

ABO blood group

Эритротест Цоликлон анти-А (R)

Erythrotest Zoliclone Anti-A (R)

Эритротест Цоликлон анти-А (F)

Erythrotest Zoliclone Anti-A (F)

Эритротест

Цоликлон

анти-В

Эритротест Цоликлон анти-Al моно

Erythrotest Zoliclone Anti-A I mono

Эритротест анти-Al лектин

Erythrotest Anti-A I lectin

Эритротест

Цоликлон

анти-Нкра

Anti-H)

ДНК- анализ генов ABO DN А

analysis of ABO genes

4+

4+

1 +

3+

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

1-2+

1 +

1 +

4+

4+

А2

4+

4+

1 +

2+

3+

3+

4+

4+

А2

4+

4+

±

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

1 +

1 +

4+

4+

А2

4+

4+

±

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

±

2+

3+

3+

4+

4+

А2

4+

4+

±

2-3+

2-3+

4+

4+

А2

4+

4+

±

2-3+

2-3+

4+

4+

А2

4+

4+

±

±

3+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

±

±

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

±

1-2+

1-2+

4+

4+

А2

4+

4+

1 +

2+

2+

4+

4+

А2

4+

4+

±

1 +

1-2+

1-2+

4+

4+

А2

4+

4+

1 +

1-2+

1-2+

4+

4+

А2

4+

4+

4+

1 +

1 +

4+

4+

4+

1 +

1 +

3+

3+

4+

±

4+

медленно

4+

медленно

4+

1 +

4+

4+

4+

1 +

±

±

нд

+2

+2

4+

4+

Аз

+2

+2

4+

4+

Аз

Результаты анализа (сила агглютинации) Test results (agglutination strength)

Эритроциты донора/больного

Red blood cells of donor/patient (№)

АВО-группа

ABO blood group

Эритротест Цоликлон анти-А (R)

Erythrotest Zoliclone Anti-A (R)

Эритротест Цоликлон анти-А (F)

Erythrotest Zoliclone Anti-A (F)

Эритротест

Цоликлон

анти-В

Эритротест Цоликлон анти-Al моно

Erythrotest Zoliclone Anti-A I mono

Эритротест анти-А1 лектин

Erythrotest Anti-A I lectin

Эритротест

Цоликлон

анти-Нкра

Anti-H)

ДНК- анализ генов ABO

DNА analysis of ABO genes

4+

4+

3+

4+

4+

4+

±

нд

пр

4+

4+

3+

4+

4+

4+

±

нд

пр

4+

4+

3+

4+

4+

4+

±

нд

пр

4+

4+

3+

4+

4+

4+

1 +

нд

пр

4+

4+

3+

4+

4+

4+

1 +

нд

пр

4+

4+

3+

4+

4+

4+

1 +

нд

пр

4+

4+

4+

2+

3+

4+

4+

нд

пр

4+

4+

4+

2+

3+

4+

4+

нд

пр

4+

4+

4+

3+

3+

4+

4+

нд

пр

4+

4+

4+

2+

3+

4+

4+

±

нд

пр

4+

4+

4+

2+

3+

4+

4+

±

нд

пр

4+

4+

4+

3+

3+

4+

4+

Примечание: нд — генотипирование не проводили; О1, О1v, О2 — аллельные варианты гена О.

Note: пр — genotyping not performed; O1; Olv, O2 — allelic variants of the O gene.

Реакция с двумя анти-Н-моноклональными реаген­тами разных производителей была идентичной (столб­цы 8—9): отрицательной или слабой с эритроцитами А1 и ярко выраженной со всеми образцами А2.

На рисунке 3 показано на примере четырех образ­цов эритроцитов А, А, АВ и АВ, как выглядит реак­ция на плоскости с набором реагентов, необходимых для установления подгруппы антигена А.

В серологическое исследование были включены образцы крови доноров, которым был проведен АВ0 (столбец 10) ДНК-анализ с использованием праймеров фирмы BAG для выявления вариантных антигенов А, который подтвердил наличие аллеля АВ0*А2 у 21 доно­ра эритроцитов. В двух случаях серологически была определена подгруппа А3 (на плоскости наблюдалась замедленная агглютинация на 2+ на фоне свободных эритроцитов, в гелевом методе отмечали расслоение эритроцитов в пробирке), однако генотипирование вы­явило аллель АВ0*Аг Прямым секвенированием ДНК доноров этих образцов эритроцитов были идентифи­цированы аллели АВ0*А2.05 и АВ0*А2.06.

Обсуждение

Антигены групп крови систем АВ0 являются угле­водами (карбогидратами), то есть структурами, ко­торые формируются в результате биохимических процессов с участием гликозилтрансфераз. Гены всех углеводных антигенов, в том числе А и В, кодируют гликозилтрансферазы — ферменты, которые перено­сят конкретные сахара на углеводную цепь-предшест­венник и формируют соответствующий антиген . Предшественником для синтеза антигенов А и В яв­ляется антиген Н, к которому А-гликозилтрансфераза присоединяет N-ацетилгалактозамин (GalNAc), а В-гликозилтрансфераза присоединяет галактозу (Gal) (рис. 1). На эритроцитах группы 0 присутствует большое количество антигена Н, неконвертированного в А- и/или B-антигены. Синтез А- и/или В-антигенов приводит к снижению количество антигена Н на по­верхности эритроцита. Таким образом, экспрессия ан­тигенов A и/или B и экспрессия антигена H обратно пропорциональны.

Рисунок 1. Структура антигенов А и В, типы олигосахаридных Н-цепей предшественников. GlNAc — N-ацетилглюкозамин; Gal — галактоза; Fuc — фукоза; GalNAc — N-ацетилгалактозамин. Типы цепей 2-4 являются эндогенными, тип 1 (не показан) может адсорбироваться на эритроциты из плазмы. Типы цепей различаются не только составом, но и положением гликозидной связи между сахарами (а или β; 1-3, 1-4). Полисахаридные цепи соединены с протеинами (P) или сфинголипидами (S) мембраны эритроцита

Figure 1. Structure of the A and B antigens; types of oligosaccharide precursor H-chains/ GlNAc — N-acetylglucosamine; Gal — galactose; Fuc — fucose; GalNAc — N-acetyl- galactosamine. Chain types 2-4 are endogenous, type 1 (not shown) can be adsorbed onto red blood cells from plasma. The types of chains differ in composition, as well as in the position of the glycosidic bond between sugars (a or β; 1-3, 1-4). Polysaccharide chains are linked to the proteins (P) or sphingolipids (S) of the erythrocyte membrane

Углеводные Н-цепи имеют различное биохимиче­ское строение. На эритроцитах могут присутство­вать четыре типа Н-цепей, на которых формируются соответственно 4 типа антигена А (рис. 1). Нумерация подгрупп антигена А (А1, А2, А3) и цифро­вые обозначения типов углеводной цепи (типы 1, 2, 3, 4) не связаны между собой. Тип 1 Н-цепей синтезируется эпителиальными клетками и является предшествен­ником растворимых антигенов, которые обнаружива­ются в слюне или плазме у лиц-«секреторов». На эри­троциты такие антигены адсорбируются из плазмы. Эндогенные эритроцитарные типы Н-цепей — это типы 2, 3 и 4. На эритроцитах А экспрессируются все типы антигена А. На А — и А2В-эритроцитах присут­ствует антиген А, представленный на Н-цепях типа 2. Показано, что ключевым отличием фенотипов А1 и А2 является различная экспрессия антигена А типов 3 и 4: тип 3 отсутствует на эритроцитах А2В и слабо выра­жен на эритроцитах А , тип 4 полностью отсутствует на эритроцитах А и А В (рис 2). Эти отличия связаны с тем, что активная А -гликозилтрансфераза эффективно конвертирует H вещество в А антиген и переносит GalNAc на Н-цепь любого типа, в то время как А2-гликозилтрансфераза имеет субстратные огра­ничения и не способна прикреплять иммунодоминант- ные сахара на Н-цепи типа 3 и 4.

Рисунок 2. Количественные и качественные различия A1- и А2-эритроцитов.

Высота столбцов демонстрирует относительное количество H- и А-антигенных детерминант на мембранах эритроцитов. Сильная А1 трансфераза активно утилизирует молекулы Н-антигена (верхняя панель), превращая их в антиген А1, в то время как трансфераза А2 оставляет существенное количество антигена Н, не конвертированного в антиген А (нижняя панель). Эр — эритроциты

Figure 2. Quanfifafive and qualitative differences between A1 and A2 red blood cells. The height of the columns denotes the relative amount of H and A antigenic determinants on the membranes of red blood cells. The strong A1 transferase actively utilizes the molecules of the H antigen (upper panel) turning them into the A antigen, while the A2 transferase leaves a significant amount of the H antigen not converted to the A antigen (bottom panel). RBCs — red blood cells

Основным реагентом, используемым для дифферен­циации подгрупп, является анти-А1-лектин. Он пред­ставляет собой экстракт из семян бобового растения DoLichos biflorus. Экстракт реагирует с обеими под­группами А эритроцитов, но при нужном разведе­нии проявляет преимущественно анти-А1-активность. Другой анти-А1 диагностикум, Цоликлон анти-А1, представляет собой комбинацию двух моноклональ­ных анти-А1-антител. Как показывают данные, пред­ставленные в таблице 2, и лектины, и моноклональные антитела могут вызывать агглютинацию некоторых образцов эритроцитов А2, причем сила агглютинации варьирует. Было установлено, что анти-А1 моноклональные антитела, входящие в состав Цоликлона, реа­гируют с антигеном А, экспрессированном на Н-цепях типа 3 и 4 . Эти структуры присутствуют на эри­троцитах А1, а на эритроцитах А2 их либо очень мало, либо они не обнаруживаются вообще (рис. 2). Зная эпитопную специфичность анти-А1-моноклональных антител, можно предполагать, что Цоликлон анти-А1 выявляет на эритроцитах А2 слабо экспрессирован­ные детерминанты антигена А типа 3, создавая ви­димость неспецифической реакции. Такая проблема не возникает при тестировании эритроцитов группы А2В, поскольку сильная В-трансфераза конкуриру­ет со слабой А2-трансферазой и утилизирует общие Н-предшественники.

Полезным реагентом для подтверждения подгруп­пы является анти-Н-реагент. Активная А -глико- зилтрансфераза превращает в антиген А существенно больше молекул Н, чем А2-гликозилтрансфераза. Таким образом, содержание антигена Н на эритроцитах А ниже, чем на эритроцитах А , и поэтому анти-Н-реа- генты практически не агглютинируют А -эритроциты, но дают сильную реакцию с А2-эритроцитами. В та­блице 2 и на рисунке 3 видно, как четко различают подгруппы антигена А все анти-Н-реагенты. Реагент компании ImuMed называется анти-Н (А2), однако ми­шенью антител является антиген Н, а дополнительная подпись в скобках (А2) — это скорее указание к при­менению. В настоящей работе были использованы только моноклональные анти-Н-реагенты. Экстракт из ULex europaeus также выявляет антиген Н и может применяться с той же целью.

Рисунок 3. Реакция агглютинации на плоскости эритроцитов A1 Α1B, А2 и А2В с реагентами анти-А, анти-В, анти-А1 и анти-Н (фото). В рядах 1-4 показана реакция агглютинации эритроцитов с различными анти-А1 реагентами. Отчетливо видно, что анти-А1 лектины агглютинируют эритроциты А2, однако сила агглютинации заметно слабее, чем с эритроцитами А1. Ряды 5-6 демонстрируют, что анти-Н реагенты сильно реагируют с эритроцитами А2 и практически не реагируют с эритроцитами А1. Ряды 7-8, агглютинация с цоликлонами анти-А и анти-В1 приведена для подтверждения группы крови

Figure 3. Slide agglutination of A1 Α1B, A2 and A2B red blood cells using anti-A, anti-B, Onti-A1 and anti-H reagents (photo). Rows 1-4 show the agglutination of red blood cells using various anti-Ai reagents. The figure clearly shows that Mnti-A1 lectins agglutinate A2 red blood cells; however, the strength of agglutination is noticeably weaker than with A1 red blood cells. Rows 5-6 demonstrate that anti-H reagents strongly react with A2 red blood cells and practically do not react with Ai red blood cells. In rows 7-8, the agglutination reaction using anti-A and anti-B Zoliclons is given to confirm the blood group

Таким образом, в рутинной практике для диф­ференциации подгрупп А1 и А2 в большинстве слу­чаев достаточно двух реагентов: анти-А и анти-А1. Моноклональные реагенты анти-А одинаково надежно выявляют А и А и четко реагируют с эритроцитами А , а реагенты анти-А при необходимости позволят дифференцировать А1 от А2 и более слабых подгрупп. Моноклональный реагент Цоликлон анти-А: явля­ется адекватной заменой лектину анти-А . В случае сомнительного результата реакции эритроцитов с анти-А -реагентом следует провести тестирование с реа­гентом анти-Н: сильная реакция укажет на А , отрица­тельная или слабая — на А1.

У двух доноров в настоящем исследовании было отмечено расхождение результатов серологических и молекулярных методов: серологически была опре­делена подгруппа А3, генотипирование методом ПЦР выявило аллель АВ0*А. Прямое секвенирование ДНК показало сочетание мутантных аллелей, которое про­являет себя как фенотип А . Праймеры наборов А-variant Type (фирмы BAG) подобраны к наиболее ча­сто встречающимся вариантам и не могут выявить все мутации гена АВ0. За очевидными результатами генотипирования могут маскироваться мутантные аллели, что и наблюдалось в двух образцах.

Очевидно, что поиск генетических разновидностей антигена А представляет интерес для исследования эволюции гена, описания новых или редких вариан­тов , но в практической трансфузиологии гене­тическое типирование каждого реципиента со сла­бым антигеном А затруднительно и нерационально. Кроме того, результаты генетического анализа по­зволяют лишь предсказать наличие антигена; окон­чательное решение принимается на основе данных серологического исследования, как в приведенном выше случае. Тем не менее в литературе предлагает­ся использовать ДНК-анализ как подтверждающий тест в тех случаях, когда у здоровых доноров со сла­бой подгруппой антигена А не совпадают результа­ты перекрестного AB0-типирования, и компонент крови при этом бракуют. Авторы считают, что уточ­нение группы с помощью ДНК-анализа позволит избежать нерациональной отбраковки таких компо­нентов .

Гематоген — сладкий батончик из нашего советского детства — до сих пор пользуется бешеной популярностью среди детей и взрослых всех возрастов. И все же некоторые смотрят на это лакомство с неодобрением — главным образом, потому, что все вокруг уверены: его делают из бычьей крови. Но так ли это на самом деле и насколько полезен гематоген? Сейчас расскажем.

  • Из чего делают гематоген
  • Это полезно?

Из чего делают гематоген

Правда ли, что гематоген делают из бычьей крови? - фото 1

Фото: sandid/.com

Несмотря на то, что внешне гематоген напоминает щербет, и к тому же имеет приятный запах, в него действительно добавляют альбумин — белок, который содержится в крови быков. На это указывает и само название сладкого лакомства — его можно перевести с латыни как «рожденный из крови».

Помимо альбумина, в гематогене содержатся сгущенное молоко, сахар, сироп глюкозы и ванилин. По крайне мере, такого рецепта придерживались на советских заводах, а вот современные производители на добавки не скупятся и охотно смешивают животный белок с орехами, мюсли, фруктами и шоколадом.

Процесс изготовления гематогена занимает около 24 часов. Сначала сладкие ингредиенты нагревают до определенной температуры и перемешивают, дают остыть, а затем добавляют к ним альбумин. В дальнейшем из полученной массы формируют бруски, которые застывают на следующий день.

Надо сказать, многие иностранцы до сих пор удивляются, как русские могут есть конфеты из крови. Зато нас прекрасно понимают жители бывших советских республик, где гематоген, как и в России, можно купить в любом супермаркете.

Это полезно?

Правда ли, что гематоген делают из бычьей крови? - фото 2

Фото: Sergei Frolov/Википедия

Начнем с того, что гематоген изобрели в Швейцарии в 1890 году, и тогда он представлял собой смесь бычьей крови и яичных желтков. В 1920-х гематоген стали выпускать и в СССР, а советские врачи назначали его детям, беременным женщинам и кормящим матерям с низким гемоглобином и дефицитом железа. Кроме того, гематоген входил в ежедневный рацион солдат Красной армии в годы Второй мировой.

К слову, тогда эти батончики делали прямо на мясокомбинатах сразу после забоя быков, и продавались они исключительно в аптеках. Однако с распадом Советского Союза многие заводы приостановили производство альбумина, поэтому сейчас его приходится импортировать — зато гематоген продается и в обычных магазинах.

Но насколько же полезен гематоген на самом деле? Действительно, альбумин способен повысить уровень гемоглобина в крови, вот только современные батончики «гематоген» содержат не больше 5% данного белка. Все остальное — это в основном сахар. Между тем, врачи предупреждают, что употребление настолько сладких продуктов могут привести к желудочно-кишечной дисфункции, которая в свою очередь может стать причиной аллергии. И особенно опасно это для детей дошкольного и младшего школьного возраста.

Гематоген в жидком виде производили в России в конце XIX века по аналогии микстуры из Швейцарии. В виде твердой плитки эту сладость на основе бычьей крови впервые выпустили в 1917 году.

Являясь биологически активной добавкой к пище или профилактическим железосодержащим препаратом, гематоген стимулирует образование эритроцитов. Гематоген получают из крови крупного рогатого скота, которую предварительно подвергают дефибринированию и сушке. Кровь так же специальным образом обрабатывают, исключая инфекционные составляющие. В состав гематогена входят аскорбиновая кислота, мед, сгущенное молоко, сахар, шоколад, орехи и прочие добавки необходимые для улучшения вкусовых качеств конечного продукта. Обычный гематоген по внешнему виду схож с небольшими шоколадными плитками. Съев кусочек гематогена можно ощутить во рту ненавязчивый привкус молочного ириса.

Среди молодых девушек населяющих Россию и Европу в XVIII-XIX веках была распространена «бледная немочь», которая возникала в результате железодефицитной анемии, а не чахотки, как считали в те времена. Заболевание сопровождалось вялостью, головокружением, слабостью и повторяющимися обмороками. Впервые эти симптомы с хронической кровопотерей связал русский врач С. П. Боткин, однако истинную причину заболевания, которая заключалась в дефиците железа, выявили только в 30 годах XX века. Именно в то время ученые заинтересовались швейцарским гематогеном — жидкой микстурой из крови быков, и после революции гематоген стали выпускать в нашей стране в виде сладких плиток.

Согласно законам и правилам юриспруденции и народной медицины гематоген можно причислить к лекарственным средствам. Однако некоторые административные факторы делает это невозможным. При производстве медицинского препарата производится жесткий контроль качества каждой серии продукции, а это чревато задержкой в отпуске гематогена в продажу. Такая строгая проверка не касается добавок к пище, к тому же БАДы можно реализовывать не только в аптечных пунктах, но и в продуктовых магазинах. Но следует учесть и то, что медицинские препараты облагаются меньшим налогом на добавленную стоимость (10%). Именно поэтому разные производители гематогена выпускают свой продукт то под видом биологической добавки, то под видом лекарственного средства. Но, где бы вы не приобрели гематоген, следует придерживаться установленных рекомендаций по его употреблению: взрослым не более 50 г в сутки, детям не более 35 г.

Гематоген — это витаминоподобное лекарство, фармакологическое действие которого не вызывает никаких сомнений. Железо, входящее в состав данного продукта, связано с белками — в желудочно-кишечном тракте человека оно легко и практически полностью усваивается. Сегодня на рынке можно повстречать множество разнообразных препаратов железа. Они высокоэффективны и в сравнении с гематогеном обладают лучшим противоанемическим действием. Однако гематоген применяли длительное время — это проверенное средство, которое обладает приятным вкусом, приемлемым качеством и сравнительно невысокой стоимостью. При использовании гематогена практически не выявлено побочных эффектов.

Данный продукт является источником полноценного протеина, который сбалансирован по набору аминокислот, минеральных веществ, углеводов и жиров. Его рекомендуется употреблять не только при анемии вследствие железодефицита, но и после тяжелых инфекционных заболеваний, при язве двенадцатиперстной кишки и желудка сопровождающейся хронической кровопотерей, хроническом геморрое и неполноценном питании. Гематоген дают детям, если у них наблюдается отставание в развитии и росте. В составе гематогена присутствует витамин А, который необходим при нарушении зрительной функции. Детям ретинол необходим во время формирования глазного яблока. У пожилых людей этот витамин улучшает состояние кожи, волос и ногтей.

Гематоген не рекомендуется употреблять при индивидуальной непереносимости компонентов входящих в его состав, а так же при ожирении, сахарном диабете и анемии не связанной с железодефицитом.